細胞在運輸過程中因溫差，震蕩，碰撞等原因可能會出現漂浮成團的現象，不用著急，T25表面消毒放入培養箱中平衡2-4h后按以下步驟操作即可恢復貼壁。

① 收集所有培養基及漂浮細胞到無菌50ml離心管，1000rpm，5min離心收集細胞沉淀。

② 取培養基上清到4℃保存，用于培養細胞，以平穩過度到客戶自己的培養基。在原50ml離心管中加入5mlPBS重懸細胞沉淀，盡量吹散后1000rpm，5min離心，棄上清。

③ 加入1ml胰酶輕輕震蕩混勻，勿直接吹打細胞，然后放入培養箱消化2-3min，消化完成后用移液器輕輕吹打幾下，吹散細胞后立刻加5ml完培終止消化。1000rpm，5min離心，棄上清。

④ 加入1ml完培重懸細胞接種到新培養瓶中。T25加10-12ml培養基培養，通常2天左右換液一次，若培養基變黃及時換液，以維持一個相對穩定的培養條件，有利于細胞活正常生長。

注意：

原T25剩余貼壁細胞密度大于70%，可以正常消化傳代；貼壁細胞較少可以加培養基正常培養至70%密度以上消化傳代；若幾乎沒有細胞則可以丟棄。

若出現傳代后次日貼壁較少的情況，可以收集培養基及漂浮細胞到離心管，離心收集未貼壁細胞，然后加新培養基盡量重懸吹散后接種回原培養瓶讓細胞繼續貼壁，注意小心操作，避免將已貼壁細胞吹下。

由于貼壁較弱細胞消化時間本身較短，必須控制消化時間和吹打力度，避免細胞消化或吹打死亡過多導致無法正常貼壁生長。

1.培養基營養不足以及pH值過低時會使細胞活力大幅度下降，建議加足量培養基培養細胞，特別注意培養基變黃后要及時換液；

2.換液時注意不要直接沖擊到細胞表面以及過冷的試劑處理細胞，避免細胞回縮脫落；

3.細胞不要長時間高密度培養，70-80%密度左右即可傳代，以維持細胞有較好的活性；

4.不要將細胞放置室溫過久或經常挪動細胞，盡量讓細胞靜養。

5.細胞貼壁較弱，培養過程細胞通常呈聚集放射狀生長，可能會有部分細胞漂浮生長；

6.建議使用TC表面處理的高貼培養瓶或明膠、多聚賴氨酸等包被的培養瓶培養細胞，有利于細胞貼壁生長。

【SNL-356】LNCaP clone FGC（人列腺癌細胞）

【SNLM-356】人列腺癌細胞用培養基

公 司 簡 介

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公司主要研發生產細胞系、原代細胞、胎牛血清、培養基、輔助試劑等系列產品，提供細胞及培養配套產品一站式采購；細胞庫凍存細胞系500余種，同時通過不間斷引種細胞擴大豐富細胞種類；公司還提供人源細胞系的STR鑒定、大小鼠的種屬鑒定服務等。  

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